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天然呈味核苷酸检测

2025-12-24

天然的呈味核苷酸主要有5'-肌苷酸(IMP)、5'-鸟苷酸(GMP)、5'-黄苷酸(XMP)、5'-腺苷酸(AMP)等,磷酸基位于核糖的C-5'位,当C-5'磷酸基解离后才呈现出新鲜的味道。另外,嘌呤环第6位官能团是羧基,通过影响分子的酸碱性、极性和氢键的形成来影响味道特性。呈味核苷酸是RNA水解产生的嘌呤类的核苷酸,可作为食品天然鲜味的重要来源。比如GMP来源于香菇、酵母提取物、干海带、豆类等,有清新、香菇般的植物鲜味。IMP主要来来源于动物肌肉组织,具有浓郁醇厚的肉鲜味。AMP来源于发酵食品或部分的植物组织,鲜味较弱。

呈味核苷酸的核心结构是嘌呤碱基、核糖和5'-磷酸基团。其中,磷酸基团是带负电,极性较强。羟基和氨基这些极性基团能形成氢键,进一步增强水溶性。总体上来说,它们是极性化合物,易溶于水,几乎不溶于有机溶剂。液相色谱测呈味核苷酸,可用表面封端处理的C18色谱柱,且能支持100%水作为流动相,在pH2-8内保持稳定。使用紫外检测器,波长260nm,也可以通过DAD扫描确定对应核苷酸的波长。

核苷酸的等电点较低,可用缓冲液(如磷酸二氢钾)调节pH值到5-6,以稳定离子化状态,减少拖尾现象。常用的流速1ml/min,根据出峰的情况调整,进样量10-20ul,根据样品的浓度适量增减。柱温也是比较关键的,保证基线平稳的同时,在一定程度上也影响流速和色谱柱中的传质效率。

精确称量2g的样品,加入5ml的2.5%高氯酸(样品量和试剂量是呈一定比例的),匀浆。呈味核苷酸在酸性条件下(pH<4)和加热时会降解,而在4℃条件下,可稳定保存至少24小时。超声的时候,要4℃低温提取30min,4000r/min离心10min,取上清液,加入50%的KOH水溶液,调节pH为6.5左右,用纯水定容,摇匀后过0.45um的膜,然后上机测定,上机之前要平衡一段时间。通过标准曲线(6个浓度点)计算含量。


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