常见的核苷酸有8种:腺苷酸(AMP),鸟苷酸(GMP),胞苷酸(CMP),尿苷酸(UMP),脱氧腺苷酸(dAMP)、脱氧鸟苷酸(dGMP)、脱氧胞嘧啶核苷酸(dCMP)、脱氧胸腺嘧啶核苷酸(dTMP)。
核苷酸种类
1.AMP,有3个异构体,具有低能键。其中,cAMP是环化腺苷-3′,5′-磷酸。
2.4种脱氧核苷酸:dAMP,dGMP,dCMP,dTMP。
3.GMP,由3个部分组成:磷酸基团,戊糖,鸟嘌呤碱基。通过鸟苷酸环化酶催化,产生3',5'-环鸟苷酸(cGMP)。
4.CMP,RNA的构成成分,天然的是胞苷-5′-磷酸。
5.AMP参与合成辅酶I(NAD+),辅酶II(NADP+),黄素腺嘌呤二核苷酸(FAD),辅酶A(CoA)。AMP吸收能量可变成ATP,ATP释放能量,会水解成ADP、AMP。
检测方法:高效液相色谱(HPLC)法,液相质谱联用(LC-MS)等。
样品提取:精确称取约 0.2g试样于 2mL 离心管,加入 1mL 2.5%高氯酸水溶液,充分振荡1min ,低温超声 20min ,13000r/min 离心 20min ,取上清液过0.45μm滤膜,待测。
色谱条件:C18柱(250 × 4.6mm, 5μm),流动相一般用K₂HPO₄和甲醇,1.0-1.5ml/min,进样量10-20ul,根据样品杂质的情况调整。可以使用紫外检测器,或连接质谱检测器。

呈味核苷酸一般是从自然界的动植物中提取出来的,可以增强食物的风味和口感,帮助提升鲜味。科研实验室,一般通过高效液相色谱(HPLC)法测定。
呈味核苷酸种类:腺苷酸(AMP),鸟苷酸(GMP),肌苷酸(IMP),胞苷酸(CMP),尿苷酸(UMP),黄苷酸(XMP)。
检测方法:
前处理:精确称取约0.2g试样于 2mL 离心管,加入 1mL 2.5%高氯酸水溶液,放置振荡器充分振荡混匀 1min,低温超声 20min,13000r/min 离心 20min,取上清液过 0.45μm 滤膜,待液相色谱测定。
色谱条件:十八烷基硅烷色谱柱(C18),长250mm,内径4.6mm,粒径5um,柱温25-30℃;0.035mol/L 磷酸二氢钠(pH=6.8)为流动相,等度洗脱,流速1ml/min;紫外检测器,波长260nm,进样量10-20uL。
标准曲线,梯度稀释6个点,峰面积手工或自动积分,相关系数1≥r2>0.999。

核苷/核苷酸测定指标:胞嘧啶,鸟嘌呤,尿嘧啶,1-甲基腺苷,3-腺苷酸,7-甲基鸟苷,二磷酸腺苷(ADP),一磷酸腺苷(AMP),三磷酸腺苷(ATP),环磷酸腺苷(cAMP),二磷酸鸟苷(GDP),三磷酸鸟苷(GTP),尿苷二磷酸(UDP),腺苷(ADO),氧化型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD+),还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NADH),NADP+,NADPH等。