腺苷是由腺嘌呤和核糖组成的核苷,腺嘌呤提供碱性基团,参与遗传信息传递。化学式为C10H13N5O4,易溶于水,难溶于乙醇和乙醚。D-核糖是骨架结构,形成核苷的基本信息。腺苷有一磷酸腺苷(AMP)、二磷酸腺苷(ADP)、三磷酸腺苷(ATP)等。
腺苷是由腺嘌呤和D-核糖通过β糖苷键连接起来的有机化合物,其中碱基部分为腺嘌呤或腺嘌呤衍生物,糖基部分为D-核糖(五碳糖)。腺苷的衍生物包括核苷酸(如腺苷酸AMP)和核酸等。含腺苷比较多的物质,主要有水果类(如大枣、山楂)、中药材(如黄芪、人参)、肉类(如羊肉、牛肉)、食用菌(如香菇、灵芝)、动物组织类(猪心、脑组织、鸡蛋)、茶叶(如发酵茶)等。
腺嘌呤碱基是一种含氮杂环有机物,通过9位氮原子和核糖连接,参与传递遗传信息。五碳糖是以环状结构(呋喃糖)为骨架,通过β-N9-糖苷键和腺嘌呤结合。腺苷的核糖部分能够磷酸化形成腺苷酸(AMP),参与能量代谢。腺苷易溶于水,稳定性受到pH值和温度影响。
检测方法:
1.高效液相色谱(HPLC)
样品用研磨机充分粉碎并搅拌均匀,精确称取约0.1g(精确到0.0001g)混匀试样于15mL 离心管,加入 6mL 10% 甲醇溶液,放置振荡器充分振荡混匀1min,重复超声2次,每次30min,结束后,4000r/min离心10min,取上清液过0.45μm 滤膜,待液相色谱测定。
测试条件:
检测器:DAD C18色谱柱:250*4.6mm;5μm
柱温:40℃ 波长:260nm 流速:1ml/min 进样量:20μL
标准曲线,定量计算。

2.超高液相色谱串联质谱(UPLC-MS/MS)
精确移取混匀全血样本0.05mL于2mL白色离心管。加入0.1mL质谱级乙腈,涡旋振荡1min。4度12000r/min离心25min。转移上清液用水稀释2倍,过滤膜待上机。
QC同样品处理方法一致。全程在湿冰上进行处理。
超高液相色谱仪:Waters UPLC
串联四级杆质谱 :AB SCIEX 4000 MS/MS
色谱柱:Waters BEH Amide 2.1*100mm 1.7μm
UPLC-MSMS方法:
色谱分离条件:
柱温:40 °C,流速:0.3mL/min
进样盘温度:10度
流动相组成:A-0.1%甲酸水 B-乙腈
洗脱程序:梯度洗脱
MSMS条件:
气帘气:35 psi
碰撞气:7psi
离子喷雾电压:+5500、-4500
离子模式: ESI±离子模式
离子源温度:450 °C
离子对参考。

腺苷衍生物分类
AMP、ADP、ATP、ADA、SAM
检测方法:高效液相色谱(HPLC),一般包括前处理,色谱峰(标品+样品),标准曲线(6个点,1≥r2>0.999,RSD≤2%),含量计算等
C18的色谱柱,250mmx4.6mm,5um;甲醇和磷酸盐(pH=6.5)(10:1)为流动相,等度洗脱。柱温30℃,紫外检测器(UV),260nm。流速为1.0mL/min,进样量10uL。

如果样本含量比较低,或液相色谱的灵敏度不够,可推荐用液相色谱串联质谱(LC-MS/MS)。
相关测试指标:
dAMP,dGMP,dCMP,dTMP,CMP,FAD,CoA,UMP,IMP,GMP,AMP,ATP,ADP,XMP,GTP,GDP等。
送样要求:
动植物组织一般0.5g,细胞10^7,液体300uL等。