皂苷的种类繁多,主要包括三萜类皂苷和甾体皂苷。含有皂苷的植物有豆科、蔷薇科、葫芦科、苋科等。中药例如人参、三七、知母、远志、甘草、桔梗、柴胡、重楼等都含有皂苷。植物皂苷分为三萜皂苷和甾体皂苷,三萜皂苷分为四环三萜和五环三萜,其中四环三萜根据母核不同,有羊毛脂烷型(如人参皂苷),达玛烷型(如黄芪皂苷),葫芦烷型等。五环三萜根据母核不同,有齐墩果烷型(如甘草酸),乌苏烷型(如积雪草酸),羽扇豆烷型(如白桦脂酸)等。甾体皂苷分为螺旋甾烷类和变形螺旋甾烷类,其中螺旋甾烷类的母核是螺旋甾烷或其异构体,常见于百合科(如知母、重楼)和薯蓣科(如薯蓣)等植物,变形螺旋甾烷类如燕麦皂苷B等。三萜皂苷,还有稀有皂苷(如Rg3,Rh2等)。
以人参皂苷为例
研究人参皂苷有多种药理活性,比如抗氧化,抗炎,抗过敏等。调节肠道菌群平衡,辅助阻断相关因子表达或坏细胞侵袭。增强免疫细胞的活性,如 T淋巴细胞,B淋巴细胞等。它是天然的抗氧化成分,可清除自由基,滋润皮肤,增加皮肤弹性。调节神经递质的释放和传递,缓解焦虑等情绪,放松压力,提高记忆力等。增强心肌供血,改善心肌缺氧的状态。
人参皂苷亚型:rd,rb2,rb1,rb3,ra3,rg3,rh1,rg2,rg1,re,rh2,rf,f2,ck,Rc,Ro等,稀有人参皂苷等。
可用高效液相色谱(HPLC)和液相串联质谱(LC-MS/MS)测定。
液相色谱条件
检测器:ELSD 波长203nm
色谱柱:C18,250*4.6mm*5μm
柱温:30℃
流动相:水:乙腈 梯度洗脱
流速:0.8-1mL/min
进样量:10-20μL
标准品用甲醇溶解和定容,标准曲线(6个点),计算含量。

UPLC-MS/MS检测
前处理:将植物样品在液氮下研磨后充分混匀取约0.3g(精确至0.0001g)样品于15mL离心管中,加入5mL提取溶液异丙醇:水:甲酸(80:19:1,V/V),匀质2min,放置4 度超声提取1h,浸提液以10000r/min离心10min得上清液。然后再加入1ml二氯甲烷,低温超声提取30min,10000r/min离心10min得上清液,重复超声提取一次,合并3次上清液。室温氮气减压至水相,定容至1ml,振荡混匀,用甲醇稀释2倍后过0.22μm滤膜,待测。
色谱质谱条件
液相色谱仪器:Waters UPLC
质谱 :AB 4000 MS/MS
色谱柱:waters BEH C18 2.1*100mm 1.7μm
柱温:35 °C,流速:0.3mL/min
进样盘温度:10℃
流动相组成:A-0.1%甲酸水
B-乙腈
MS条件:
气帘气(Curtain Gas):35 psi
碰撞气(Collision GAS):7psi
离子喷雾电压(IonSpray voltage):+5500V、-4500V
离子模式 ESI±模式
离子源温度(Temperature):450 °C
离子源气体 IonSource Gas1:40psi
离子源气体 IonSource Gas2:50psi

送样要求:
样本量要大于0.2g或0.2mL