花色苷是黄酮类化合物,基本结构包括2个苯环,通过C6-C3-C6骨架连接,含有共轭双键,能够吸收更多的光线,从而呈现五颜六色。在酸性环境中呈红色,中性的时候为紫红色,碱性的时候呈蓝色。有很多的花色苷,是从植物中分离提取出来的。花色苷连接的羟基数是不定的,随着数量的增加,颜色逐渐向紫色移动。花色苷还可以和金属离子形成络合物,从而改变颜色。
花青素类指标:
常见的有6种,即天竺葵色素(Pg)、矢车菊色素(Cy)、飞燕草色素(Dp)、芍药色素(Pn)、牵牛花色素(Pt)和锦葵色素(Mv)。
1.天竺葵色素(Pg),能够清除NO自由基,具有抗氧化活性。
2.芍药色素(Pn),水溶液加热时脱色,加入HPLC,颜色会回复。醇溶液遇到FeCl3不显色,遇到醋酸钾呈紫色,用水稀释会产生红棕色沉淀。
3.牵牛花色素(Pt),pH为5-8的时候呈绿色,pH为13的时候呈亮黄色。
4.锦葵色素(Mv),从锦葵的根、茎、叶和果实中提取,广泛存在红色的水果中。
5.飞燕草色素(Dp),在酸性溶液中呈红色,碱性溶液中呈蓝色,中性呈紫色。
6.矢车菊色素(Cy),由2个芳香环和1个苯并咪唑环组成。
花色苷指标:
飞燕草素-3-0-半乳糖苷
飞燕草素-3-0-葡萄糖苷
飞燕草素-3-0-芸香糖苷
矢车菊素-3-0-葡萄糖苷
矢车菊素-3-0-阿拉伯糖苷
矮牵牛素-3-0-葡萄糖苷
矮牵牛素-3-0-半乳糖苷
锦葵色素-3-0-半乳糖苷
芍药素-3-0-阿拉伯糖苷
锦葵色素-3-0-葡萄糖苷
锦葵色素-3-0-阿拉伯糖苷
芍药素-3-0-葡萄糖苷
飞燕草素-3-0-5-0-二葡萄糖苷
矢车菊素-3-0-5-0-二葡萄糖苷
天竺葵素-3-0-葡萄糖苷
矢车菊素-3-0-半乳糖苷
检测方法:
高效液相色谱(HPLC)、液相色谱串联质谱(LC-MS/MS)
液相条件:
1)色谱柱:ACQUITY BEH C18 1.7 µm,2.1 mm*100 mm;
2)流动相:A相为超纯水(加入0.1%的甲酸),B相为甲醇(加入0.1%的甲酸);
3)洗脱梯度: 0.00 min B相比例为5%,6.00 min增至50%, 12.00 min增至95%,保持 2 min,14 min降至5%,并平衡2 min;
4)流速0.35 mL/min;柱温40 ℃;进样量2 μL。
质谱条件:
电喷雾离子源(Electrospray Ionization,ESI)温度550 °C,正离子模式下质谱电压 5500 V,气帘气(Curtain Gas,CUR)35 psi。在Q-Trap 6500+ 中,每个离子对是根据优化的去簇电压(Declustering Potential,DP) 和碰撞能 (Collision Energy,CE)进行扫描检测。

