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总淀粉检测

总淀粉检测

测试范围

研究植物的总淀粉含量,用于评估作物淀粉含量,指导育种。在食品领域,检测原料淀粉含量,优化加工工艺。

样品前处理需通过酸解或酶解工艺将淀粉水解为葡萄糖后进行检测,采用3,5-二硝基水杨酸比色法(DNS法)检测还原糖,使用葡萄糖作为标准参照物,检测波长设定在540nm,淀粉换算系数为0.9。

植物淀粉含量试剂盒法,微量法

测定意义:

淀粉是植物中糖的主要储存形式,其含量测定对于评价食品营养价值和调查植物体内糖代谢都有重要意义。

测定原理:

利用 80%乙醇可以把样品中可溶性糖与淀粉分开,进一步采用酸水解法分解淀粉为葡萄糖, 采用蒽酮比色法测定葡萄糖含量,即可计算淀粉含量。 

需自备的仪器和用品: 

可见分光光度计/酶标仪、水浴锅、可调式移液器、微量石英比色皿/96 孔板、研钵、冰、浓 硫酸(不允许快递)和蒸馏水。

 试剂的组成和配制: 

试剂一:液体 100mL×1 瓶,4℃保存; 

试剂二:液体 70mL×1 瓶,4℃保存; 

试剂三:粉剂×1 瓶,4℃保存; 

淀粉提取: 

1、称取 0.1~0.2g 新鲜样本(建议称取约 0.1g 新鲜样本)于研钵中研碎,加入 1mL 试剂一, 充分匀浆后转移到 EP 管中,80℃水浴提取 30min,3000g,25℃离心 5min,弃上清,留 沉淀。 

2、 沉淀中加入 0.5mL 蒸馏水,放入 95℃水浴中糊化 15min(盖紧,以防止水分散失)。 

3、 冷却后,加入 0.35mL 试剂二,25℃常温提取 15min,振荡 3-5 次。 4、 加入 0.85mL 蒸馏水,混匀,3000g,25℃离心 10min,取上清液待测。

 注意:如样本为淀粉含量较高的干样,为保证充分提取,可适当减小取样量,如称取 0.01g~0.02g 干样,加入 1mL 试剂一,其余提取步骤同上。 

测定步骤: 

1、分光光度计或酶标仪预热 30min 以上,调节波长至 620nm,蒸馏水调零。

2、调节水浴锅至 95 度。

3、工作液的配制:临用前在试剂三中加入 3.75mL 蒸馏水后,缓慢加入 21.25mL 浓硫酸, 不断搅拌,充分溶解,待用;用不完的试剂 4℃保存一周; 4、样本测定:取50μL样本和250μL工作液至EP管中,95度水浴10 min(盖紧,防止水分散 失),自然冷却至室温,取200uL至微量石英比色皿或96孔板中,在620 nm 波长下记录测 定吸光度值A。

淀粉含量计算:

a.用微量石英比色皿测定的计算公式如下 

标准条件下测定的回归方程为 y = 5.872x - 0.0295;x 为标准品浓度(mg/mL),y 为吸光值。

1、按照蛋白浓度计算 淀粉含量(mg/mg prot)=[(A+0.0295)×V1]÷5.872 ÷(V1×Cpr)=0.17×(A+0.0295) ÷Cpr 

按样本鲜重计算 淀粉含量(mg/g 鲜重)= [(A+0.0295)×V1] ÷5.872÷(W×V1÷V2) =0.289×(A+0.0295) ÷W V1:加入反应体系中样本体积,0.05mL;V2:加入提取液体积,1.7 mL;Cpr:样本蛋白质 浓度,mg/mL;W:样本质量,g 


特色服务

1.签订测试合同后先测试,可提交测试结果满意后再付款

2.送检金额单次超过3000元,干冰送货上门和样本包邮费

3.技术经验丰富,沟通流畅

4.价格实惠


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