黄酮类化合物是一组具有不同酚类结构的天然物质,存在于水果、蔬菜、谷物中。根据分子结构不同可以分为黄酮醇、黄烷酮、黄酮、异黄酮、儿茶酸、花青素、查尔酮、二氢查尔酮等。类黄酮物质主要有花色苷、黄酮醇、黄酮和异类黄酮等它们具有抗氧化、抗炎、抗诱变等特性,并具有调节关键细胞酶功能的能力,是各种营养保健品、药物和化妆品应用中不可或缺的部分。黄酮类化合物对人类疾病也有着重要的防治价值。
研究黄酮类化合物的作用和意义,主要有以下几个方面
可以拓宽血管,防止出现拥堵现象。增强免疫力,激活巨噬细胞大口的吞掉坏的细胞。抑制COX-2,NF-kB等炎症通过,减少促炎因子的释放。促进动物多种激素的分泌和调节。制药的过程中的也需要一些黄酮类化合物。黄酮类化合物有提高动物机体抗氧化及清除自由基的能力。
黄酮类化合物是具有C6-C3-C6结构的一类化合物的总称,主要包括以下几种类别
1.黄酮和黄酮醇,黄酮是2个苯环通过三个碳(C)连接,B环连接在C2位,C3位无羟基,如芹菜素、黄芩素、黄芩苷等。C3位如果有羟基(-OH)就是黄酮醇,如槲皮素、芦丁等。
2.异黄酮和二氢异黄酮,异黄酮的B环连接在C3位,如大豆素、葛根素。二氢异黄酮是异黄酮的C2-C3位的双键被还原为单键,如紫檀素、鱼藤酮等。
3.双黄酮类,由两个黄烷基本结构通过三碳链连接形成二聚体。如银杏素、异银杏素等。
4.花色素类,带正电荷的氧鎓离子结构。如飞燕草素、矢车菊素等。
5.查尔酮,三碳链未成环的开链结构。如异甘草素、根皮素、补骨脂乙素等。
6.二氢黄酮与二氢黄酮醇,如橙皮素、水飞蓟素、陈皮素、甘草苷等。
检测方法:高效液相色谱(HPLC)、液相色谱串联质谱(LC-MS/MS)、比色法等。
HPLC用于常规含量的测定,LC-MS/MS用于代谢产物分析,比色法用于快速初筛。
以HPLC为例
在样品中加入适量液氮,研磨至粉末。精确称取混匀样品0.5g(精确到0.0001g)于15mL离心管中,加入2mL甲醇后超声提取45min,离心10min,转移上清液,重复上述操作提取3次,合并3次萃取液。将上清液室温氮气浓缩至近干,用 50%甲醇定容至2mL,离心10min,将上清液过0.22μm 滤膜待测。
仪器条件
色谱柱:C18 4.6*250mm,5μm
检测器:DAD 流速:1mL/min 波长:260nm
柱温:30℃ 进样量:20μL
流动相:甲醇:0.4%磷酸水 梯度洗脱
标准曲线绘制
以标准溶液的浓度(μg/mL)为横坐标,对应的峰面积为纵坐标,绘制标准曲线。计算线性回归方程和相关系数(r),要求相关系数 r≥0.999。
样品测定
根据样品溶液的峰面积,代入相应的标准曲线线性回归方程,计算样品溶液中黄酮类化合物的含量。

黄酮类化合物测定指标:根皮素,根皮苷,柠檬苦素,异槲皮苷,金丝桃苷,木犀草素,芹菜素,紫杉醇,山奈酚,刺槐素,橙皮甙,陈皮甙,黄芪苷,黄芪素,黄芩苷,葛根素,大豆苷,大豆黄酮,染料木苷,漆黄素,二氢杨梅素,柚皮素,萹蓄苷,鹰嘴豆芽素,紫花木槿素,香橙素,圣草次苷,圣草酚,金雀异黄素,异荭草素,水飞蓟素,异牡荆素,大豆异黄酮,柚皮苷,二氢查尔酮,桑色素等。
送样要求:
植物400mg,油100ul,植物提取物200ul,种子400mg