植物皂苷是一类存在于植物中的苷类化合物,由1个亲脂性的苷元或皂苷元和1个或多个亲水性的糖链通过糖苷键组成的。它们主要分布于豆科(如大豆皂苷、人参皂苷、甘草苷),五加科(如三七皂苷),薯蓣科,百合科,葫芦科,蔷薇科,远志科等植物。苷元主要分为载体皂苷元(由27个碳原子组成,具有螺甾烷的基本骨架)和三萜皂苷元(由30个或30个以上碳原子组成,具有四环或五环的三萜母核),糖链是亲水性的部分,通常由2-5个单糖(如葡萄糖,半乳糖,鼠李糖等)组成,连接在苷元的不同位置上。糖苷键在酸、碱或酶的作用下可以水解,生成苷元和糖。
如果要单独测某种皂苷,如人参皂苷,需要确定具体的亚型。人参皂苷分为三类:原人参二醇型(如Rb1,Rb2,Rg3)、原人参三醇型(如Re,Rg1)、齐墩果烷型(如Ro)。每种单体的结构和功能都有差异,比如,人参皂苷Rg1是极性化合物,易溶于水、甲醇、乙醇等极性溶剂,不易溶于氯仿、乙醚、苯等非极性有机溶剂。检测方法有高效液相色谱(HPLC)和液相色谱串联质谱(LC-MS/MS)。
将植物样本清洗干净,研磨成粉,精密称量1g(精确到小数点后五位),放在离心管或具塞锥形瓶中,加入适量的甲醇,放置过夜。或超声后,放置在80℃水浴上加热回流2小时,放冷,定容,过滤。
液相色谱测人参皂苷Rg1含量,采用反相C18色谱柱,柱温35℃。乙腈和水为流动相,加0.1%磷酸或甲酸来改善峰形。梯度洗脱,如0min,20%乙腈和80%水,20min,35%乙腈和65%水,25min,40%乙腈和60%水,30min,20%乙腈和80%水。流速1ml/min,检测波长203nm,进样量10-20ul(根据样品浓度)。液相色谱串联质谱,通过将样品分离,能量碰撞,形成带电离子,质荷比进行筛选,用人参皂苷Rg1的离子对,对化合物进行定性和定量分析。