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植物有机酸含量测定

2026-01-16

有机酸分子中的羧基(-COOH)能电离出氢离子(H+),使得水溶液呈酸性。有机酸广泛存在植物果实、中药材和食品中。它包括脂肪族有机酸(如酒石酸、草酸、苹果酸、柠檬酸、抗坏血酸),芳香族有机酸(如苯甲酸、水杨酸、咖啡酸),萜类有机酸(如齐墩果酸、甘草酸、熊果酸)。不同种类的有机酸含有羧基数量不同,酸性也有差异。小分子有机酸(如甲酸、乙酸)具有较高的挥发性和较低的溶点,随着碳链的增长,有机酸的熔点和沸点逐渐升高,甚至趋向于脂溶性,影响到生物体内的多种过程。

植物体内的有机酸,提取出来可应用于水产养殖(消除水体毒素,分解油膜和泡沫,提高溶氧量;降低氨氮、亚盐、硫化氢等有害物质,聚落重金属),如果高温、水浑、亚硝酸盐高时候,谨慎使用有机酸。在食品加工领域,部分有机酸(如柠檬酸、乳酸、苹果酸、酒石酸)可用于着色,增加酸味,改善味道,延长保质期。医药领域,有机酸(如绿原酸、甘草酸)具有抗菌、利胆、抗炎、增强免疫力等作用。有机酸还是细胞能量代谢的核心枢纽,特别是在TCA循环过程中。

有机酸溶于水,在提取的过程中就直接用水来做溶剂。比如,精确称量4g,放在15ml的离心管中,加入5ml的水,4℃超声30min,4℃冰箱2h,4000r/min离心10min,0.45um膜过滤,待测。有机酸是极性化合物,可用亲水性的C18色谱柱(250mmx4.6mm,5um),柱温30℃。紫外检测器,波长210nm。流速1ml/min,进样量10-20uL。流动相用甲醇和水(0.1%磷酸水,为了保持有机酸的分子状态,保持良好的峰形),如果单个有机酸,可用等度洗脱的方式,如97:3。如果含有多个不同种类的组分,可用梯度洗脱,根据出峰情况调整时间和对应的比例。

假如,要测苹果酸或酒石酸,可用标品稀释成10mg/L,20mg/L,50mg/L,100mg/L,200mg/L的梯度,对各个峰面积进行积分,并绘制出标准曲线,拟合出回归方程。根据样品峰的面积,代入到回归方程,可计算出样品溶液中有机酸的含量。标准曲线要经过原点,回归方程相关系数R2≥0.999接近于1。


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