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木质素含量测定方法

2025-12-15

木质素主要存在细胞壁中,它的浓度分布是不同的。其中,细胞间层达到80%左右,其次是次生壁内层、次生壁外层、细胞腔附近。虽然细胞间层浓度比较高,但它的厚度比较薄的,实际上大多数的木质素是分布在次生壁中的。不同种类的植物,木质素含量也是有比较大差异的。比如,针叶木很高,而草本植物就比较低了。木质素的分布方式是不均匀的,就像装电器的泡沫箱子,能够有效的填充和粘连纤维素,从而增强植物细胞壁的强度和韧性。

在植物的生理代谢过程中,木质素具有重要的作用。一、木质素可加厚细胞壁,抑制微生物的代谢,抵御病原体的入侵。二、木质部中形成一个个长的、圆形的管道网络,用于植物水分和养分的向上运输。三、在阳光下利用水和空气合成过氧化氢,参与植物的生化反应。四、木质素赋予了植物强度和硬度,可承受住外在的冲击,保持其柔韧性和直立生长。五、帮助植物应对外界的环境压力,比如干旱、病虫害等,增强其生存能力。

木质素的检测方法有两种,一种是采用比色法来测总木质素含量,另外一种是用液相色谱来测木质素单体GSH的含量。

蒽酮比色法:木质素在浓硫酸的作用下会脱水生成糖醛衍生物,产物能和蒽酮试剂发生反应,生成蓝绿色的络合物,在吸光度620nm处能够和木质素含量呈线性的关系。

首先,要将植物样品在80℃烘箱中烘到恒重,粉碎成末过30-50目的筛。接着,称取一定量的处理过的样品,加入蒽酮试剂和浓硫酸,充分振荡。将反应管放入沸水浴中,保持1min,取出后自然冷却到室温。以空白为参比,在620nm的波长下测定反应液的吸光度值。通过制作标准曲线,利用回归方程可计算出木质素的含量。

液相色谱法:样品提取(氧化铜还原,提取浓缩),采用C18色谱柱,250*4.6mm;5μm,柱温30℃。乙腈和1.5%乙酸水为流动相,梯度洗脱,流速1ml/min。DAD检测器,波长254nm、280nm;进样量20uL(根据样品的浓度进行调整10-20ul),标准曲线,含量计算等。


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