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白头翁皂苷含量检测方法

2025-08-20

植物白头翁是一种传统的中药材,始载于《神农本草经》,性寒,具有清热解毒的作用。白头翁皂苷主要包括B4和A3两种,主要来源于毛茛科植物白头翁。在药理应用方面,主要有抗菌抗炎,神经保护,增强免疫力等。白头翁皂苷 A3的化学式为C41H66O12,分子量为750.956,可溶于甲醇,乙腈,乙醇等溶剂,不溶于石油醚。白头翁皂苷B4来源于干燥的根,它的化学式为C59H96O26,分子量为1221.38,可溶于甲醇,乙醇,DMSO等有机溶剂。

科研方面,检测白头翁皂苷含量,一般采用高效液相色谱(HPLC)或液相色谱质谱联用(LC-MS)等。以HPLC为例,简单的介绍一下检测流程。

1.样品处理

一般采用有机溶剂提取法,如粉碎过筛后,加入适量的甲醇,超声处理,让皂苷充分的溶解出来。然后,冷却,过滤,得到含有机溶剂的皂苷。根据相关的标准或操作步骤,可以获得相对详细的操作步骤和参数。在有相关设备,溶剂,技术的前体下,无死角地完成操作。有的时候,需要对粗提液进一步的纯化,比如用大孔树脂等。

2.色谱条件

举例,采用C18的色谱柱,长250mm,内径4.6um,粒径5um;柱温30-40℃。流动相为乙腈-0.1%磷酸溶液(29:71) ,也有甲醇和水(80:20)的流动相,流速为0.8-1.0ml/min,进样量10-20uL。检测器的话,有用到紫外检测器,二极管阵列检测器,质谱检测器等。质谱检测器,是在流动相分离提取的基础上,实现对化合物的离子碎片化,确认化合物的分子量和化学结构,能够更准确的计算出含量。

3.标准曲线

精密称量白头翁皂苷B4或A3对照品,加入甲醇,制成0.1mg/mL的溶液。成倍的,梯度稀释6个浓度点,确保在检测器的有效范围内。进样,测定色谱峰,对面积进行积分,对应各个标准溶液浓度,绘制标准曲线,得到回归方程。

4.含量计算

和标准曲线相同的色谱条件,进样到HPLC,测出色谱峰,根据保留时间确定目标化合物。对色谱峰面积进行积分,结合回归方程,可以计算出样品中的白头翁皂苷含量。


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