芝麻酚的化学名是3,4-亚甲二氧基苯酚,是一种脂溶性木酚素类化合物,具有强的抑菌、抗突变、抗氧化等生理活性。它最初是从芝麻油中提取出来的,当然也可以通过化学合成的方法获得,被广泛的应用在食品和医药领域。它的化学式为C7H6O3,分子量为138.12,微溶于水,易溶于乙醇和DMSO等。
常用的检测方法:高效液相色谱(HPLC)或质谱(MS)等。
1.样品处理
称取2g样品,放入聚四氟乙烯离心管中,加入2ml得90%乙腈水溶液,旋涡振荡2min混匀。超声提取10min,离心5min,吸取乙腈层溶液到10ml容量瓶,残余的再用2ml的90%乙腈提取一次,混合到容量瓶中,用水定容到10ml,过0.22um膜,待测。
2.色谱条件
C18色谱柱,250x4.6mm,5um;柱温30℃;乙腈:水=10:90为流动相,等度洗脱,流速0.5-1ml/min;紫外检测器,波长290nm;进样量10uL,根据杂质的程度调整。
3.标准曲线
将芝麻酚的标准品进行溶解制成1mg/ml,梯度稀释到6个浓度点,确保这些点在检测限范围内。进样到HPLC中,测出对应的色谱峰,记录保留时间和峰面积。将每个峰面积和它对应的标准溶液浓度,拟合标准曲线,获得回归方程,相关系数1>R2>0.999。
4.样品测定
进样HPLC测出色谱峰,根据标准品的保留时间,可以找到样本溶液色谱图中的目标色谱峰。对峰进行手工或自动的积分处理,将峰面积代入到回归方程,可计算出样品中的芝麻酚含量。