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川陈皮素含量测定方法

2025-08-19

川陈皮素主要是从芸香科植物柑橘类(如陈皮)中提取出来的一种黄酮类的化合物,具有抗氧化,抗炎,保护心血管等生物活性。化学式是C21H22O8,分子量为402.39,含多个甲氧基和羟基,决定其生物活性。广泛应用在医药研发,食品加工等行业。川陈皮素微溶于水,而易溶于甲醇、乙醇、丙酮、醋酸、乙醚等有机溶剂。

科研实验室常用的检测方法是高效液相色谱(HPLC)或液相色谱质谱联用(LC-MS)。

1.样品处理

将样品粉碎研磨,过24目筛,精密称量0.2g,放到具塞锥形瓶中,精密加入25mL的甲醇,一起称取重量后就开始进行超声处理了。超声波设置300W的功率,频率调整为40kHz,超个45分钟,放冷,再称量一次看看重量有没有变少。如果真的变少了,就用甲醇来补足一下。这个时候,就是要微调的添加,不能加多了。然后就要摇匀,0.45um膜过滤一下,准备检测。

2.色谱条件

C18色谱柱,250mm长,4.6mm内径,5um粒径,柱温25℃;以乙腈和水为流动相,梯度洗脱,流速1ml/min;紫外检测器,波长330nm,进样量5-10uL。

3.标准曲线

称取川陈皮素的对照品适量,加入甲醇配置成25ug/mL的标准溶液母液。再对它进行成倍的稀释,形成6个逐渐降低的浓度点。确保浓度在检测限的有效范围,这样测出来的数据才是准确的。进样到HPLC,测出各个浓度点的色谱峰,记录保留时间。对色谱峰进行积分和它的标准溶液浓度一起,就能拟合出标准曲线,得的回归方程。其中,回归方程的相关系数1>R>0.999。

4.含量计算

进样到HPLC中记录色谱峰的情况,根据保留时间可以找到样品的色谱峰,对这个色谱峰的面积积分,代入到回归方程,就计算出样品中的川陈皮素含量。


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