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硬脂酸含量测定方法

2025-08-18

硬脂酸属于长链饱和脂肪酸,是37种脂肪酸中的一种。在长链饱和脂肪酸中,主要有肉豆蔻酸,棕榈酸,硬脂酸和花生酸。硬脂酸的化学式为C₁₈H₃₄O₂,广泛存在动物脂肪和某些植物油中,应用于食品、化妆品、药物、塑料和橡胶工业以及蜡烛制造等领域。硬脂酸在化学上相对稳定,不易被氧化。不溶于水,稍溶于冷乙醇,加热时较易溶解。微溶于丙酮、苯,易溶于乙醚、氯仿、热乙醇等。

检测方法:气相色谱(GC)或气相质谱联用

1.样品皂化

精确称取0.005g样品,倒入15mL透明离心管,加入5mL 正己烷、3mL CH3OH-KOH(0.5mol/L)混匀,60℃烘箱中甲酯化30min,取出4000r/min 离心 10min,取全部上清,过 0.22μm 滤膜,待测。

2.色谱条件

可用DB-23的色谱柱,30mx0.25mmx0.25um,程序升温,初始50℃保持1min,以25℃/min升到175℃保持0min,以4℃/min升到230℃保持10min。流速为1.3ml/min,氮气和氢气的流量为30ml/min,空气流量为300ml/min,分离比5:1。采用FID检测器,检测器温度250℃,进样口温度250℃,进样量1uL。

3.标准曲线

配制硬脂酸的标准母液,并进行适当的梯度稀释,覆盖到样本溶液可能的范围。需要考虑到检测限,稀释倍数等。一般是5-7个浓度点,依次进样到HPLC中,测定标准溶液的各个浓度点的色谱峰。记录各个标准峰的保留时间,对各个峰的面积进行积分,拟合出标准曲线,得到回归方程。

4.样品测定

将样品溶液进样到HPLC中,根据保留时间找到样品的硬脂酸的色谱峰。对峰面积进行积分,并代入到回归方程,计算出进样到HPLC的样本溶液中硬脂酸的含量。


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